Rev. peru. biol.
Vol. 8 • Nº 1 • 2001
© Facultad de Ciencias Biológicas UNMSM |
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EFECTOS EMBRIOTÓXICOS DE Picrosia
longifolia DON (ASTERACEAE)
Víctor Benavides, Guadalupe D’Arrigo
y José Pino*
Resumen.-
Se ha evaluado los probables efectos tóxicos del extracto acuoso de Picrosia longifolia
Don “Achicoria” sobre el desarrollo de embriones preimplantacionales de ratón.
Extracto acuoso de P. longifolia al 20%, 10% y 0% fue suministrado a ratonas
preñadas hasta las 86 horas postcópula (hpc). Al evaluar el estadio embrionario se
encontró que el extracto acuoso de P. longifolia al 10% y 20% causó retraso en
el desarrollo embrionario. También se observó una disminución en la viabilidad
embrionaria en los grupos tratados. Tanto la disminución de viabilidad como el retraso en
el desarrollo se produjo en una forma dosis dependiente.
Abstract.-
The toxic effects of aquous extract of Picrosia longifolia Don “achicoria” on
preimplantational mouse embryo development were evaluated. Aquous extract of P.
longifolia to 20%, 10% and 0% (control group) was supplied to pregnant mice to 86
hours post-copula (hpc). When embryonic stage was evaluated, we found that aquous extract
of P. longifolia to 10% and 20% causes delay in embryo development. Also the
embryonic viability declined in treated groups with achicoria.
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Actualmente existe una mayor aceptación
de la medicina natural como alternativa para tratar diversas afecciones, empleando
preparaciones de plantas medicinales (Trujillo et al., 2000; Benavides et al., 2000).
P. longifolia es una planta nativa de América del Sur usada en la medicina
natural como refrigerante en los estados febriles y en trastornos intestinales
(Sagástegui, 1973). Existen muchos trabajos con plantas medicinales en los cuales no se
evalúa los posibles efectos secundarios que puedan aquellas a nivel de toxicidad general
ni los efectos de su ingesta durante el período de gestación. El estudio de los
embriones preimplantacionales para el entendimiento del mecanismo de embriotoxicidad en
estadios tempranos de la gestación ha generado nuevas perspectivas sobre la acción de
drogas y tóxicos ambientales (Del Valle & Orihuela, 1996).
En el presente trabajo se ha evaluado los efectos embriotóxicos del extracto acuoso de P.
longifolia en embriones preimplantacionales de ratón.
La planta fue obtenida de los mercados de Lima e identificada mediante las claves
vigentes. En el laboratorio se procedió al secado (colocándolas en la estufa a 60º C
durante 24 h). Se usaron ratones Albino-Swiss mantenidos en nuestro laboratorio bajo
condiciones de bioterio de 14 horas luz y 10 oscuridad. Hembras de 6 a 8 semanas de edad
fueron superovuladas inyectándoles intraperitonealmente 5 UI de PMSG y 48 horas después
se le inyectó 5 UI de HCG. Luego fueron cruzadas con machos fértiles de 8 a 12 semanas
de edad, comprobándose la cópula al día siguiente por la presencia del tapón vaginal.
Las hembras preñadas fueron separadas en tres grupos: Grupo control (Achicoria 0%, al que
se le suministró diariamente ad libitum agua potable); Grupo A y Grupo B, a los demás
grupos se les suministró una infusión al 20% y al 10% (p/v) de Achicoria. El extracto
acuoso al 20% y 10% fue preparado colocando 2 g y 1 g respectivamente de la planta seca en
10 mL de agua potable previamente calentada a 60 ºC; se dejó en infusión durante 15
minutos más a la misma temperatura; se dejó enfriar y decantar; luego se separó el
sobrenadante, el cual fue suministrado a los animales en las mismas condiciones que el
grupo control, hasta las 86 horas postcópula (hpc). La infusión fue renovada
diariamente. Las hembras fueron sacrificadas por dislocación cervical, y se les
extirparon los oviductos y los cuernos uterinos; luego los embriones fueron obtenidos por
perfusión, mediante lavados sucesivos con Buffer Fosfato Salino (PBS; SIGMA) pH 7,4. Los
embriones se examinaron en un microscopio de contraste de fase y se determinó el grado de
viabilidad realizando una evaluación morfológica considerando lo siguiente (4): Grado 1:
el embrión es redondo y no tiene blastómeros libres; Grado 2: El embrión tiene
blastómeros libres; Grado 3: el embrión tiene blastómeros libres y malformaciones
severas; Degenerados: el embrión pierde su forma esférica, además presenta membrana(s)
celular(es) rotas. Se evaluó un total de 364 embriones divididos como sigue: Grupo
control 148 embriones, Grupo A 119 y Grupo B 97. A los resultados se les aplicó la prueba
de x2.
Los resultados obtenidos evidencian una mayor incidencia de alteraciones morfológicas en
los embriones tratados con la infusiones de achicoria, observándose una disminución de
embriones de grado 1 en los grupos A y B donde se encontró 21,01% y 37,11%
respectivamente mientras que en el grupo control se registro 66,89% de embriones de Grado
1 y como consecuencia de esto se observa un incremento de embriones de Grado 2 y 3 y de
embriones degenerados en los grupos tratados con achicoria contrastado con el grupo
control (Tabla 1). En cuanto al estadio de desarrollo se observa un retraso en el
desarrollo evidenciado por el incremento en el número de embriones de 1-8 células y
mórulas encontrados en los grupo A y B con respecto al grupo control y a su vez se
registró una disminución de embriones en estadio de blastocisto siendo en el grupo A y B
50,42% y 48,41% respectivamente, mientras que en el grupo control se registró 76,35%,
siendo estas diferencias significativas (Tabla 2).
TABLA N° 1
Efectos del extracto acuoso de achicoria en la morfología embrionaria, expresado
en porcentajes.
|
s |
Grado 1 |
Grado 2 |
Grado 3 |
Grado 4 |
Control
Grupo A
Grupo B |
66.89 (99)
21.01 (25)*
37.11 (36)* |
18.92 (28)
29.41 (35)**
20.62 (20) |
8.11 (12)
15.13 (18)*
30.93 (30)* |
6.08 (9)
34.45 (41)*
11.34 (11)* |
Los asteriscos designan
diferencias significativas entre el control y los grupos tratados (*p<0.005,
**p<0.025)
Los números en paréntesis representan la cantidad de embriones evaluados. |
Existen muy pocos reportes científicos
sobre las propiedades y efectos tóxicos de P. longifolia. Nuestros resultados evidencian
una disminución en la viabilidad del embrión debido al aumento en la frecuencia de
embriones de grado 3 y embriones degenerados en los grupos A y B, y a su vez también se
ha observado un retraso en el desarrollo embrionario. La disminución en la formación de
blastocisto puede estar relacionada con el decrecimiento de la proliferación celular, lo
que incrementaría la cantidad de embriones retrasados (Orihuela e Ishiyama, 1991)
TABLA N° 2
Efecto sobre la distribución de los estadios de desarrollo en porcentajes.
|
s |
1-8 células |
Mórula |
Blastocito |
Control
Grupo A
Grupo B |
8.78 (13)
37.82 (45)*
12.37 (12) |
14.86 (22)
26.05 (31)*
39.18 (38)* |
76.35 (113)
36.13 (43)*
48.45 (47)* |
Los asteriscos designan
diferencias significativas entre el control y los grupos tratados (*p<0.005)
Los números en paréntesis representan la cantidad de embriones evaluados. |
Los resultados obtenidos en este trabajo
evidencian un fuerte potencial embriotóxico del extracto acuoso de P. longifolia
en embriones preimplantacionales de ratón.
Bibliografia
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* Laboratorio de Reproducción y Biología del Desarrollo,
Facultad de Ciencias Biológicas-UNMSM. Av. Venezuela s/n. Casilla Postal 14-002, Lima 14,
Perú. E-mail: vbenavides23@hotmail.com
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