Alicia Rubio^b, Nieves Sandoval^c y Raúl Rosadio^c.

ABSTRACT. A serologic study was conducted to determine the existence of antibodies to canine coronavirus (CCV) in 36 sera of dogs between 2 and 12 month old from the Department of Lima. None of the animals had been vaccinated against the virus and all came from unvaccinated mothers. The antibodies were detected by the Indirect inimmo fluorescenttechnique. A 50.0% (18/36) of the tested animals were positive. Thirteen of the eighteen positive sera (72.2%) were from dogs older than five months and 5/18 (26.8%) were from dogs younger than 4 months old. The existence of antibodies in these animals demonstrates previous experience with canine coronavirus.

Key words: Peruvian Canine Coronavirus antibodies. Indirect Inmunofluorescent test.

RESUMEN. Se realizó un estudio serológico para determinar la presencia de anticuerpos contra coronavirus canino (CVC) en 36 sueros, de perros entre 2 y 12 meses de edad y procedentes del Departamento de Lima. Ninguno de estos animales tenían antecedentes de vacunaciones contra coronavirus y todos procedían igualmente de madres no vacunadas. Los anticuerpos fueron detectados mediante la prueba de Inmuno-fluorescencia indirecta. Un 50.0% (18/36) de los sueros muestreados resultaron positivos a la prueba. Trece de los 18 positivos (72.2%) fueron mayores de 5 meses y 5/18 (27.8%) fueron menores de 4 meses. La presencia de anticuerpos en estos animales demuestra infección con el coronavirus.

Palabras claves: anticuerpos, Coronavirus canino, Perú, Inmunofluorescencia indirecta.

Las enteritis caninas virales son problemas comúnes observados en la práctica de Medicina Veterinaria de Animales menores. Estas enteritis virales son comúnmente causadas por el Parvovirus canino (PVC), Rotavirus canino (RVC), virus del Distemper canino (VDC) y Coronavirus canino (CVC).¹

Los coronavirus son agentes etiológicos con predilección por células del tracto respiratorio, digestivo, hepático y sistema nervioso central en numerosas especies domésticas, silvestres y humano.² El CVC fue aislado por primera vez en 1971 durante un brote de enfermedad díarreica en perros del ejército alemán. En 1978, el CVC fue aislado nuevamente durante un brote epizoótico de gastroenteritis en perros que asistían a una exposición canina en el sudeste de los Estados Unidos. Actualmente el CVC, enzoótico a nivel mundial, ha sido aislado o identificado en España,³ Japón,⁴ Tailandía, Estados Unidos y Australia.⁵

A pesar de que Médicos Veterinarios especialistas en animales menores en Lima Metropolitana inmunizan a perros contra la infección coronaviral, utilizando vacuna a virus vivo modificado, no existen estudios que determinen la presencia de la infección.

Con la finalidad de determinar la presencia de anticuerpos al CVC se trabajó 36 sueros de caninos entre 2 y 12 meses de edad, de diferente sexo y raza, sin antecedentes de vacunaciones contra coronavirus canino y procedentes de madres con similar historia. El 88.9% de las muestras procedían de diferentes distritos o urbanizaciones de la Provincia de Lima (n=32) y el 11.1% de la Provincia de Huaral (n=4) del Departamento de Lima.

El muestreo comprendió 19.4% animales con antecedentes clínicos de gastroenteritis hemorrágica aguda (GEHA) (n=7) y 80.6% animales sin antecedentes clínicos de GEHA (n=29).

La encuesta serológica fue realizada utilizando la prueba de Inmunofluorescencia indirecta usando antígeno viral presente en cultivo celular de origen renal felino, infectado con el coronavirus canino, fijado en láminas portaobjetos y procedente del Veterinary Medical Research and Development (VMRD Inc, Pullman, WA, USA).

De los 36 sueros procesados, 18 de ellos presentaron inmunofluorescencia citoplasmática positiva a CVC (Figura 1). Estos resultados demuestran que el 50% de los perros muestreados del Departamento de Lima poseen anticuerpos contra el CVC y serían consecuencia de exposición viral. La prevalencia encontrada en el estudio es similar a la previamente reportada en otros paises.^6,7

Los animales positivos proceden de diferentes zonas del Departamento de Lima; Los perros reactores positivos son de distintas edad es, comprendida entre 2.5 y 12 meses de edad (Cuadro 1). Sin embargo el 72.2% (13/18) de estos positivos fueron perros mayores de 5 meses. Estos hallazgos concuerdan con reportes en donde se manifiesta que los animales jóvenes tienen menor tendencia a ser seropositivos y que el título de anticuerpos se incrementa al aumentar la edad de los animales.^1,6 Estos resultados explican también que estos anima les tuvieron tiempo suficiente para entrar 1 en contacto con el virus y producir anticuerpos específicos. El 27.8% de positivos restantes (n=5) fueron menores de 4 meses. Las reacciones en estos animales jóvenes sugieren contacto temprano con el virus o consecuencia de persistencia de anticuerpos maternales específicos⁶, Debe mencionarse que las muestras del presencie estudio provienen de perros sin antecedentes de vacunaciones contra coronavirus y procedían de madres. sin historia de vacunación contra el virus en estudio. Estos antecedentes hacen pensar que la positividad a la prueba de Inmunofluorescencia; sea resultado de presencia de inmunoglobulinas naturales adquiridas contra el virus en estudio, pero no asociadas o inducidas por vacuna.

H = hembra.          M = macho

Es interesante anotar que el 72.2% (13/18) de los animales positivos no presentaron cuadros diarreicos asociados con GEHA (Cuadro 2). Estos resultados sugieren que los animales se expusieron al virus sin presentar cuadro clínico o tal vez presentaron cuadros leves que pasaron inadvertidos al propietario. Esta característica clínica concuerda con reportes que sugieren que la mayoría de las infecciones coronavirales en caninos son subclínicas.⁷ Sólo el 27.8% (5/18) de los perros positivos a la prueba tenían historia de GEHA. Dos perros con antecedentes de GEHA fueron serológicamente negativos, indicando que a pesar que el coronavirus se encuentra difundido en el área muestreada, otros agentes pueden ser responsables de este tipo de enteritis. No se hicieron intentos de diagnóstico definitivo para explicar etiología de estos casos, sin embargo, es probable que alguno de éstos sea infección temprana de coronavirus o causados por algún otro virus entérico, bacteria o parásito, o tal vez tratarse de infecciones simultáneas con parvovirus o aún infecciones múltiples.^8,9

El uso de la inmunofluorescencia indirecta ha permitido identificar anticuerpos contra el Coronavirus canino en el Departamento de Lima. Estos resultados son antecedentes para futuras investigaciones que contemplen no sólo la prevalencia de coronavirus en otras zonas del país, sino también elucidar el rol patogénico del CVC en las enteritis caninas.

AGRADECIMIENTO

Los autores agradecen a los Drs: Kenneth Campos, Felipe Lobatón, Marino Mendoza y Max Delgado, quienes contribuyeron en la toma de muestras. A la Dra. Laura Urteaga por su asistencia en la fotografía en el microscopio de fluorescencia. Al Dr. Scott Adams (VMRD Inc.) por permitirnos usar el Kit comercial.

LITERATURA CITADA

1. Tennant BJ, Gaskell RM, Jones RC, Gaskell CJ. Prevalence of antibodies to four major canine viral diseases in dogs in a Liverpool hospital population. J Small Anim Pract 1991;32:175-179.

2. Keenan Kk, Jervis H, Marchwicki R, Binn 1. Intestinal Infection of Neonatal Dogs with Canine Coronavirus 1: Studies by Virologic, Histologic, Histochemical, and Immunofluorescent Techniques. Am J Vet Res 1976;37:247-256.

3. Calvo M, Marcotegui MA, Simarro 1. Identificaci6n del coronavirus canino (CVC) en España. Med Vet 1993;11:605-608.

4. Tuchiya K, Horimoto T, Azetaka M, Takahashi E, Konishi S. Enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of canine coronavirus and its antibody in dogs. Vet Microb 1991;261:41-51.

5. Appel M. Canine Coronavirus. In: Appel M. Virus infections of Carnivores. Amsterdam: Elsevier Science Publisher. 1987:113-122.

6. Tennant BJ, Gaskell RM, Jones RC, Gaskell CJ. Studies on the epizootiology of canine coronavirus. Vet Rec 1993;2:7-11.

7. Herbst W, Zhang X, Schliesser T. Seroprevalence of coronavirus infections of dogs in the German Federal Republic. Berliner und Munchener Tierarztliche Wochenschrift. 1988;101:381-383.

8. Evermann J, Mckefirman A, Eugster A, et al. Update on Canine Coronavirus Infections and Interactions with other Enteric Pathogens of the dog. Comp Anim Pract Med 1989;19:6-12.

9. Appel M. Does canine coronavirus augment theeffectsof subsequent parvovirus infection?. Vet Med 1988;83:360-366.

Regresar