Alfonso Gozalob, Enrique Montoya, Jaime Descailleaux.
ABSTRACT In order to establish a colony with breeding pair of the same karyotype and avoid Possible reprod uctive barriers, a karvOtypic study was performed in 116A. vociferans. Three differente karyotypes were found with diploid numbers of 46 (61%) and 48 (37%) chromosomes. The 2n=47 karyotype was found in two female A. mciferans which we assume were hybrids between the 46 and 48 chromosome. These findings indicate the occurrence of an incomplete fusion (or fission) event that is reponsible for the high variability in Aohis chromosome number. Key words: Primates, Cebidae, Aotus sp., karyotype.
RESUMEN A fin de formar parejas isocariotipicas y evitar posibles barreras reproductivas de naturaleza cromosómica, se realizó el estudio cariotipico en 116 Aotus vocilferans. Se encontró que la población estudiada estaba compuesta de tres diferentes cariotipos con números diploides de 46 (61%), 47 (2%) y 48 (37%) cromosomas. El cariotipo de 471 cromosomas se encontró en dos ejemplares hembras y se asume sean híbridos entre los cariotipos de 46 y 48 cromosomas. Aparentemente el genero Aotus sufriría de una alta frecuencia de translocaciones robertsonianas (o fisiones céntricas) lo cual explicaría la variedad de cariotipos encontrados en la naturaleza. Palabras clave: Primates, Cebidae, Aotus sp., Citogenética.
El mono nocturno (Aotus, sp.) es un pequeño platirrino de amplia distribución geográfica en centro y sudamérica. Anteriormente conocido como una especie monotípica, a la fecha se conocen 11 cariotipos diferentes, clasificándosele fenotípicamente en dos grandes grupos, de cuello gris y de cuello rojo. Los monos Aotus son importantes modelos biológicos para el estudio de la malaria humana y la prueba de eficacia de distintas drogas contra esta enfermedad1. El estudio cariotípico de estos animales ha permitido demostrar la diferente susceptibilidad de los diversos cariotipos al ser enfrentados a las especies de Plasmodium que afectan al hombre1,2. Además, debido a la gran semejanza fenotípica de estas especies, el análisis citogenético es el único medio por el cual se pueden establecer diferencias de gran nitidez. A fin de obtener animales clínicamente conocidos, libres de patógenos específicos, se estableció en 1984 una colonia de reproducción de Aotus vociferans en la subestación del Instituto Veterinario de Investigaciones Tropicales y de Altura (IVITA) en la ciudad de Iquitos. Dado que la formación de parejas isocariotípicas evitaría posibles barreras reproductivas de naturaleza cromosómica.
MATERIAL Y METODOS Se tomaron muestras de sangre períférica (2-3 ml) de 116 Aotus vociferans procedentes de las cuencas de los ríos Napo, Nanay y Tigre (1º25'-4º24' Sur y 73º12’-74º43' Oeste) en la Amazonía peruana. Las muestras se tomaron mediante punción de la vena femoral con una aguja de 23 gauss descartable y se almacenaron en tubos vacutainer heparinizados a 10 grados centígrados hasta el momento de realizarse el cultivo de linfocitos. Las muestras de sangre entera fueron cultivadas por 72 horas en medio TC-199 (Instituto Pasteur, Francia), conteniendo fitohemaglutinina M (Difco, USA), Suero Bovino Fetal (Sigma, USA) y antibióticos (penicilina y estreptomicina). Se agregó colchicina en el lapso de las dos últimas horas del cultivo. Los linfocitos obtenidos fueron lavados con solución hipotóni-ca y fijados con solución Carnoy. Los cromosomas metafásicos fueron secuencialmente teñidos con Giemsa al 2% y coloreados para la obtención de bandas C y bandas R4,5. Por lo menos, cinco metafases de cada muestra observada al microscopio fueron fotografiadas a fin de contar el número cromosómico y registrar la morfología.
RESULTADOS Se encontró que la población estudiada de Aotus vociferans estaba compuesta por tres diferentes cariotipos con números diploides de 46, 47 y 48 cromosomas. El número diploide observado con mayor frecuencia fue 2n=46 en 71 especímenes (61%), seguido por 2n=48 en 43 ejemplares (37%) y 2n=47 en dos animales (2%). El estudio cariotípico reveló la existencia de cinco pares de autosomas subtelocéntricos, siete (2n=46) y seis (2n=48) pares de autosomas submetacéntricos o metacéntricos (uno de los cuales posee una marcada constricción secundaria) y 10 (2n=46) y 12 (2n=48) pares de cromosomas acrocéntricos. El cromosorna X y el cromosoma y fueron submetacéntrico y acrocéntrico respectivamente. La única diferencia entre los cariotipos 2n=46 y 2n=48 sería la existencia de un cromosoma metacéntrico grande en el 2n=46 (par N.º1) el cual correspondería a dos cromosomas acrocéntricos medianosenel cariotipo 2n=48 (pares N.º12 y 19). El cariotipo 2n=47 fue encontrado en dos ejemplares hembras los cualesse asume sean híbridos entre los cariotipos de 46 y 48 cromosomas. Estos hallazgos indican la ocurrencia de un evento de incompleta fusión o fisión el cual sería responsable de la alta variabilidad en el número cromosómico de Aotus.
DISCUSION Aparentemente el género Aotus sufriría de una alta frecuencia de translocaciones robertsonianas (o fisiones céntricas) lo cual explicaría la variedad de cariotipos encontrado, en la naturaleza. En su medio ambiente natural los tres cariotipos serían simpátricos6. La presencia de u n cromosoma metacéntrico grande impar en el cariotipo 2n=47 nos sugeriría que se trata de ejemplares híbridos entre los cariotipos 2n=46 y, 2n=48. Así mismo, la baja frecuencia observada del cariotipo 2n=47 (2%) apoyaría aún mas esta teoría. En el caso de que se produzca el cruce de un ejemplar de 47 cromosomas con uno de 46 o 48 cromosomas y tengan una cría viable, se espera que predomine el número par cromosómico parental en la cría (2n=46 o 2n=48) y con menor frecuencia el de 47 cromosomas, el cual, de acuerdo a la baja frecuencia observada en su medio ambiente natural, parece ser menos viable. Otros autores han notificado la viabilidad del cruce entre monos Aotus de diferentes cariotipos7,8. Sin embargo, no se ha notificado la viabilidad del cruce entre ejemplares híbridos, ni si estos son fértiles. Un caso interesante lo constituye el hallazgo de mosaicismo cromosórnico en un ejemplar hembra híbrido nacido en cautiverio en la colonia de Aotus vociferans en el IVITA, el estudio cariotípico de dicho ejemplar reveló la presencia de metafases con 46, 47 y 48 cromosomas.
CONCLUSIONES Los resultados permiten concluir: 1) La población estudiada de Aotus vociferans, está compuesta de tres cariotipos diferente, (2n=46, 2n=47 y 2n=48).2) El cariotipo 2n=46 se encontró con mayor frecuencia en su habitat natural. 3) El cariotipo 2n=47 sería un lúbrido entre los cariotipos de 46 y 48 cromosomas, y, 4) La variedad cariotípica del género Aotus se debería a una alta frecuencia de translocaciones robertsonianas o fisiones céntricas a nivel cromosómico.
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