Guillermo Leguía Pb, Teresa López U, Raúl Rosadio A, Mario Sumari Oc,
ABSTRACT Studies on the biological and pathological aspects of Spiculopteragia peruvianus are reported. Two groups of 3 months old alpacas were reared and maintained parasite-free. Group control non infected. Group infected with single oral inoculation of 50 000 Spiculopteragia peruvianus infective larvae. All infected alpacas developmend patent infection between 18 and 20 days. Depresion of appetite, diarrhoea, and wight loss were observed during patency. Plasma pepsinogen reached levels grather than 2.8 IU/L at 24 days PI and correlated with fecal egg counts. Post morten examinations showed white, raised, umbilicated nodules on the surface of the abomasum, acompanied by congestion, oedema and necrosis. Microscopically there was hyperplasia and loss of celular diferentation of chief and parietal cells of the gastric glands, and moderate infiltration of eosinophils and lymphoid cell. Key words: alpaca, Spiculopteragia, biology, pathology.
RESUMEN Se reportan estudios sobre aspectos biológicos y patológicos del Spiculopteragia peruvianus, nemátodo del abomaso de alpacas. Dos grupos de alpacas de 3 meses de edad, criados libres de parásitos, fueron distribuidos en 2 grupos de 5 animales cada uno: El grupo testigo, no inoculado. El grupo infectado, oralmente, con una dosis única de 50 000 larvas infectivas de S. peruvianus. Las alpacas del grupo B desarrollaron infección patente entre los 1 8y 20 días PI. Depresión del apetito, diarrea y pérdida de peso fue observado durante el período patente. Los niveles de pepsinógeno plasmático alcanzaron más de 2.8 IU/L a los 24 días PI y guardaron correlación con el número de huevos por g de heces. El examen post morten mostró la presencia de nódulos blancos, prominentes y umbilicados sobre la superficie del abomaso, acompañado de congestión, edema y necrosis. Microscópicamente hubo hiperplasia Y pérdida de diferenciación celular de células principales y parietales de las glándulas gástricas e infiltración moderada de eosinófilos y linfocitos. Palabras clave: alpaca, Spiculopteragia, biología, patología.
Entre las especies de nemátodos que producen diversos grados de gastritis se encuentra el Spiculopteragia peruvianus, parásito específico de las alpacas descrito por1, habiéndose reportado una prevalencia del 29%.2 Existen numerosos reportes sobre alteraciones estructurales y funcionales de las glándulas gástricas causadas por Ostertagia ostertagi en terneros que se traducen en cuadros clínicos caracterizados por deficiente digestión de los alimentos, diarrea y pérdida de peso.3,4,5,6 No existiendo estudios sobre los aspectos biológicos, clínicos y patológicos de S. peruvianus, el objetivo del estudio estuvo orientado a elucidar tales hechos a través de inoculaciones experimentales.
MATERIAL Y METODOS Obtención de alpacas libres de parásitos. Crías de alpacas, de tres días de edad, se destetaron después de la ingestión de calostro y luego confinadas en corrales de cemento a fin de prevenir infecciones por nemátodos. Allí, recibieron una alimentación consistente en leche de vaca, heno de alfalfa y chala ad libitum. Exámenes fecales realizados cada 8 días hasta la edad de 3 meses fueron negativos a la presencia de protozoos y nemátodos. Diez animales de estas características, en grupos de 5, sirvieron de testigos, e infectados, cada animal con 50 000 larvas infectivas.
Obtención de larvas infectívas. Parásitos hembras de Spiculopteragia, recolectadas del ahomaso de alpacas, se depositaron en placas Petri con suero fisiológico, donde se procedió a su disección para liberar los huevos. Estos, fueron sembrados en heces estériles e incubados a 27 ºC por 10 días, luego del cual las larvas infectivas se recolectaron por el Método de Baermann.7 Posteriormente, 3 000 larvas, vía oral, fueron inoculadas a una alpaca de un mes de edad, libre de parásitos, que sirvió como fuente permanente de larvas. Estas, se conservaron en refrigeración a 4 ºC.
Inoculación experimental. Seis alpacas de tres meses de edad, libres de parásitos, fueron distribuidas en dos grupos de tres animales cada uno: Grupo A: Control no inoculado; Grupo B: Inoculados, oralmente, con 50 000 larvas infectivas de S. peruvianus, en una sola dosis, y sacrificados, una, a los 18 días y dos, a los 30 días post inoculación, para el estudio de las alteraciones anatomopatológicas correspondientes. Realizándose igualmente, la determinación del pH abomasal y el recuento de parásitos adultos e inmaduros por el método de recuento parasitario.7
Histología y Patología Clínica. Secciones de abomaso fueron fijados en formol buferado al 10%, procesados y coloreados con Hematoxilina eosina. Semanalmente se colectaron sangre, por punción de la vena yugular, para la determinación de las constantes hematológicas (recuento de glóbulos rojos, blancos, Hb y Hto) y niveles de pepsinógeno plasmático, según la técnica de Hirschewitz8 expresado en unidades internacionales de plasma (1 unit = 1m ml de tirosina producida por minuto).
Registro del peso vivo corporal. Se realizaron al inicio del experimento y luego a los 7, 14, 21 y 30 días post infección (PI).
RESULTADOS Y DISCUSION Luego de la inoculación de las alpacas del grupo infectado con 50 000 larvas infectivas de S. peruvianus, éstas comenzaron a eliminar huevos entre 18 a 20 días postinoculación (período prepatente). El recuento fecal de huevos alcanzó su máximo el día 24 PI (200, 4,50, 3 800, 300 y 50 huevos/g heces a los 18, 21, 24, 28 y 30 días PI, respectivamente) descendiendo luego abruptamente hasta el final del experimento. Paralelamente con el período patente los animales mostraron una marcada depresión del apetito, diarrea acuosa y una pérdida significativa de peso: a los 21 y 30 días PI, se registró 16 y 16.2, y, 13 y 12 kg. para el grupo testigo y grupo infectado, respectivamente. El examen de sangre, realizado semanalmente, no reveló diferencias estadísticas significativas en los valores de glóbulos rojos, blancos, Hb y Hto. Sin embargo, los niveles de pepsinógeno plasmático se incrementaron a más del doble en los animales infectados (Fig. I), guardando una estrecha correlación con el recuento de huevos por gramo de heces. Los altos niveles de pepsinógeno plasmático encontrados indican indirectamente un daño importante a la mucosa abomasal producida por el parásito.9 El estudio anatomopatológico realizado en la alpaca sacrificada a los 18 días PI, mostró: pobre condición de carnes, abundante líquido seroso en la cavidad peritoneal, moderado hidropericardio, mucosa abomasal severamente congestionada y cubierta de nódulos umbilicados de 1 a 2 mm de diámetro, acompañada de edema y áreas de hiperplasia, siendo el pH del líquido abomasal de 5. Microscópicamente se visualizó: a) marcada dilatación de las glándulas gástricas, conteniendo larvas de 4to estadio, células epiteliales destruidas, con una infiltración moderada de eosinófilos y linfocitos; b) incremento de células productoras de mucus; c) destrucción de células principales y parietales, y d) marcada hiperplasia del epitelio con presencia de células indiferenciadas, no funcionales. En los animales sacrificados a los 30 días PI, se observó una severa congestión, edema y engrosamiento de la mucosa acompañada de hemorragias difusas con formación de múltiples nódulos umbilicados, necrosis y presencia de membranas diftéricas. El pH del fluido abomasal fue de 5.5. Microscópicamente las alteraciones fueron similares al caso anterior, observándose además una infiltración significativa de eosinófilos alrededor de las glándulas gástricas conteniendo larvas degeneradas, involución y restauración del epitelio lesionado. Los resultados obtenidos ponen de relieve la gran patogenicidad del S. peruvianus, el cual es capaz de producir graves alteraciones estructurales y funcionales de las glándulas gástricas. Resultados similares han sido reportadas en terneros infectados con Ostertagia ostertagi.4,5,10 donde las alteraciones produjeron disminución de la actividad digestiva e incremento del pH abomasal con pérdida del efecto bacteriostático coadyubando a la presentación de la diarrea. Adicionalmente, la hiperplasia de la mucosa gástrica produce un incremento de la permeabilidad permitiendo el pasaje de líquidos corporales a la luz del abomaso y viceversa. Esto, produce un drenaje de proteínas plasmáticas, vía digestiva, y una elevación de los niveles de pepsinógeno plasmático en la sangre.9,10 Esta situación, es de gran importancia clínica ya que bajo condiciones de campo las alpacas son sometidas a infecciones mixtas con O. ostertagi, T. axei, C. Mentulatus y Graphinema aucheniae, cuyas alteraciones fisiopatológicas pueden tener efectos aditivos y tornar más dramático el cuadro clínico. En los animales controles, no se observaron alteraciones clínicas ni fisiopatológicas en el abomaso, siendo el pH del fluido abomasal de 3 a 3.5. La recuperación de parásitos maduros e inmaduros en los animales sacrificados a los 30 días PI alcanzó un promedio de 39 000, que representa el 78% de la dosis inoculada, asumiendo de acuerdo al examen histopatológico, que el 22% restante se encontraría como larva de cuarto estadio en la mucosa del abomaso.
LITERATURA CITADA 1. Guerrero DC, Chávez CE. Helmintos comunicados por primera vez en alpacas, Lania pacos, con una descripción de Spiculopteragia peruvianus n. sp. Bolchi Parasitol. 1967; 24: 134-136. 2. Chávez CE, Guerrero DC, Alva J, Guerrero J. Parasitismo gastrointestinal en alpacas. Rev Fac med Vet Univ San Marcos. 1967; 21: 9-19. 3. Anderson N, Armour J, Jarret F, Jenning F, Ritchie J, Urquhart G. Experimental Ostertagia ostertagi infection in calves: results of single infection with five graded doselevels of larvac. Am J Vet Res. 1966: 27: 1259-1265. 4. Jennings FN, Armour J, Laxvson D, Roberts R. Experimental Ostertagia ostertagi infections in calves. Studies with abomasal cannulas. Am J Vet Res. 1966: 27: 1249-1257. 5. Ross JG. Experimental infection in calves with the nematode parasite Ostertagia ostertagi, Vet Rec. 1963: 75: 129-132. 6. Murray M. Structural changes in bovine ostertagiosis associated with increased permeability of the bowel wall to maeromolecules. Gastroent. 1969: 4: 763-772. 7. Soulsby Ej. Parasitologa y Enfermedades parasitarias en los animales domésticos. 7th. ed. México: Interamericana. 1988: 725. 8. Hirschewitz JD. Pepsinogen in the blood. J Lab Clin Med. 1955: 46: 568-579. 9. Michel J, Lancaster M, Hong C, Berrets S. Plasma pepsinogen levels in some experimental infectios of Ostertagia ostertagi in cattle. Vet Rec. 1978: 103: 370-73. 10. Snider T, Williams J, Sheehan D, Fuselier R. Plasma pepsinogen, inhibited larval development and abomasal lesion in experimental infection of calves with Ostertagia ostertagi. Vet Rec. 1981: 8: 173-183.
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