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Objetivo: 1. Determinar si hay diferencias en la producción in vitro de
TNF-a entre los macrófagos de pacientes con tuberculosis (TB) y los de personas sanas. 2. Observar si varía la producción in vitro de
TNF-a. entre los macrófagos de pacientes con tuberculosis (TB) y los de personas sanas luego de ser estimulados con lipopolisacáridoss
(LPS). 3. Buscar si existe asociación en la susceptibilidad genética a TB con el polimorfismo
-308 M gen TNF-a en la población en estudio.
Método: Se estudió los monocitos de 260 pacientes con tuberculosis pulmonar, de 54 con tuberculosis pleural, de 24 con tuberculosis miliar y de 253 controles sanos. Se separó los leucocitos por centrifugación con
Histopaque, se les incubó con suero AB para hacer que se adhieran los
monocitos, a los que se les sometió a inducción con LPS por 18 horas, determinando por bioensayos la producción de
TNF-a. Se extrajo el DNA de los monocitos, al que se sometió a PCR con primers específicos para el locus
TNF-a(-308), y se tipificaron genéticamente mediante polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción
(RFLP) los polimorfismos genéticos de TNF-a(-308) con la enzima de restricción
Ncol.
Resultados: Los monocitos in vitro espontáneamente produjeron 49.6±48.6, 110.2±95.7, 26.6±1.8 y 74.9±54.3 pg de
TNF-a en controles sanos, pacientes con TB pulmonar, pleural y miliar respectivamente. (p<0.05) Cuando se les estimuló con LPS a las 18 horas la producción por los monocitos fue de 3380.5±882.7, 5854.1±3941. 1566.9±470.5, 2218.1 ±789.2 pg de
TNF-a en controles sanos, pacientes con TB pulmonar, pleural y miliar respectivamente. (p<0.01) No se presentó asociación alguna entre susceptibilidad a tuberculosis y polimorfismo en la región-308 de
TNF-a, siendo el genotipo AA raro en la población peruana y la frecuencia de los alelos 1 y 2 para el polimorfismo
-308 de TNF-a de 0.94 y 0,06 respectivamente. La distribución de los genotipos de
-308 de TNF-a se ajustó a la ley de Hardy-Weinberg. (p>0.05)
Conclusiones: Se ha encontrado una expresión diferenciada de TNF-a según el tipo clínico de
TB, siendo más alta en TB pulmonar, que se incrementa significativamente por LPS y que no estuvo mediada por la presencia de la mutación en la posición
-308 del promotor del gen TNF-a.
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