Fernández L. María de Fátima¹

Resumen

La deficiencia subclínica de Vitamina A es un problema de salud pública en el Perú. El Instituto Nacional de Salud realiza desde 1996 un monitoreo nacional de indicadores nutricionales antropométricos y bioquímicos, entre ellos la prevalencia de deficiencia de vitamina A. Para ello se requiere determinar a concentración de retinol en suero.

El método de elección para la determinación de retinol en suero es la cromatografía líquida de alta presión (HPLC) debido a su alta sensibilidad y especificidad. Con el objetivo de implementar esta técnica en los laboratorios de bioquímica del CENAN se realiza un estudio de estandarización.

El método para la determinación de retinol en suero sanguíneo se lleva a cabo en varios pasos. El suero es diluido con una solución de acetato de retinol en etanol. El retinol se extrae con hexano el cual se evapora bajo atmósfera de nitrógeno y el residuo se resuspende en metanol. El retinol se separa por medio de cromatografía líquida de alta presión, utilizándose una columna de fase reversa y metanol como fase móvil. El retinol se detecta con un detector ultravioleta a 325nm. La corrida del cromatograma dura 5 minutos y el retinol se cuantifica por el método de estándar interno.

Para la estandarización del método se utilizaron los criterios de precisión y exactitud (recuperación). Se calculó la precisión del método con un conjunto de 63 datos, siendo el promedio 37,22µg/dl con una desviación estándar relativa (RSD) de 3,5%. El promedio de la recuperación calculado para (n=9) fue de 102,2417( con una RSD de 5,99 %. Los resultados demuestran que estos valores son comparables con los de los métodos convencionales reportados anteriormente para este análisis.

Palabras clave: Retinol, vitamina A, estandarización, suero. HPLC

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¹ Centro Nacional de Alimentación y Nutrición, Instituto Nacional de Salus. A.O. 451, Lima, PERÚ