LOS CROMOSOMAS DEL SAPO Bufo spinulosus (AMPHYBIA - ANURA), DEL CUSCO *.

José F Franco Navia¹ , Elio K. Iturriaga Luna² , Rosa Ochoa Vízarreta³


RESUMEN
Se describe el cariotipo del sapo andino Bufo spinulosus (Amphybia - Anura), procedente de diferentes localidades del Departamento del Cusco (Perú).
Esta especie presenta un número cromosómico de 2n=22 (NF = 42), conformada por cromosomas metacéntricos, submetacéntricos y subtelocéntricos. Los resultados son comparados con los hallazgos reportados por otros autores, para otras localidades.

ABSTRACT
The karyotypic characteristics of Bufo spinulosus (Bufonídae), are described, from different localities in Cusco (Peruvian south), establishing that the diploid number is equal to 22 chromosomes, (NF=42).
The analysis of the meiocytes (Metaphases I), showed that this species, has 11 bivalentes, (n=11).
The morphology in this species, stablishing the existences of metacentric, submetacentric, sudtelocentric chromosomes, from karyotypic data, and the existence of secondary constriction in chromosome eleven.


I. INTRODUCCION

El género Bufo (Bufonidae), se encuentra bien representada en el Dpto. de Cusco (Perú); cuya diversidad de especies registradas están constituidas por 9 especies muchas de las cuales son de amplia distribución como Bufo, spinulosus y Bufo marinus, otras son endémicas y restringidas para la zona, como Bufo inca encontrado en Machupicchu (Duellman & Schulte), así como en el valle de Kosñipata (Hurtado 1997).
La especie Bufo spinulosus a más de ser de amplia distribución, de acuerdo a Vellard (1959), se trata de una especie politipica, constituida por 6 subespecies, cuyas formas fueron descritas citogenéticamente por algunos autores extranjeros y nacionales en sendas localidades de Sudamérica
los resultados en algunos casos son discordantes Bogart (1973), Brum & Saez (1974), Córdoba et. al.(1986).
La inexistencia de datos citogenéticos, para las poblaciones naturales de la región de Cusco y el interés por caracterizar citogenéticamente las poblaciones locales, nos condujo a desarrollar el presente trabajo de carácter preliminar en el que nos avocamos a la determinación del número y morfología cromosómica de esta especie, cuyos resultados son descritos y contrastados con los datos existentes en la bibliografía sobre este tema.

II. MATERIALES Y METODOS

La muestra está constituida por 12 ejemplares (6 machos y 6 hembras, todos adultos), de Bufo Spinulosus, procedentes de diferentes localidades del Dpto de Cusco (ver tabla correspondiente). Los preparados, se efectuaron con la técnica de Ford & Hamerton (1959), los ejemplares se sacrificaron por destrucción cerebral o médula espinal. La médula ósea, los testículos, el bazo y el tejido intestinal, previa tripsinización de tejidos sólidos, (Tripsina, Sigma 0.1%), se recibió en una solución de KCl al 0.075 M, a temperatura ambiente (1 a 2 nrs), el sobrenadante se elimino por centrifugación y se fijo con carnoy (Etanol : Ácido Acético 3:1) por 5 a 10 minutos y con una pipeta pasteur se dejo caer gotas sobre una lámina portaobjetos, las que fueron secadas al aire, para ser coloreadas con Giemsa al 4% (Tb. pH 6.8).
Los mejores preparados fueron microfotografiados, con un microscopio Karl Zeiss, con cuyas ampliaciones se determinaron los cariotípos, midiéndose los valores de "r", en la escala de Levan et. al. (1964). para definir la morfología de los cromosomas.

III. RESULTADOS Y DISCUSIONES

Cariotípo : Verificamos que nuestra muestra de sapo, posee un número cromosómico diploide de 2n = 22 cromosomas, y un número fundamental NF=42 brazos principales, en coloración convencional no se pudo encontrar cromosomas relacionados con la determinación del sexo siendo los cariotípos iguales, tanto en machos como en hembras.
Los cromosomas agrupados en 11 pares fueron clasificados en los siguientes grupos: 5 pares de cromosomas mayores (pares 1,2,3 y 5 metacéntricos, el par 4 submetacéntrico), el par 6 mediano metacéntrico y 5 pares pequeños (del par 7 al par 11), de los cuales los pares 7 al 10 son metacéntricos y el par 11 subtelocéntrico, portadores de una constricción secundaria en el brazo corto (ver cariograma e ideograma correspondiente).
Cromosomas meióticos, El análisis de los meiocitos de tejido testicular, mostró la existencia de 11 bivalentes bien diferenciados los que llegan a formar configuraciones abiertas y cerradas, tal como se muestra en la microfotografía correspondiente, (n = 11), cuyo número se relaciona con el número diploide determinado en tejidos somáticos (médula ósea, bazo, epitelio intestinal).
La comparación de nuestros resultados con los reportados por autores anteriores, que estudiaron a esta especie en otras localidades nos muestran 2 resultados de comparación que pueden calificarse como:
Resultados Discordantes: Los hallazgos de Bogart (1974), cuyo cariotípo difiere notablemente, por presentar 2 constricciones secundarias en cada brazo largo del par 3 y 4 pares son cromosomas submetacéntricos. Lamentablemente este autor no indica la procedencia del material estudiado y existe la probabilidad de un error en la identificación del ejemplar cariotipeado por este autor.
Seguidamente los resultados de Brum & Saz (1974), que estudiaron material proveniente de La Paz (Bolivia), cuyo resultado difiere en la presencia de un par submetacéntrico, (cuarto par) y la predominancia de 10 pares metacéntricos.
Resultados concordantes: Nuestros resultados son en un 100% similares a los reportados por Córdova et. al. (1986), los que puede ser apreciado en la tabla correspondiente.

BIBLIOGRAFIA

1. Cordova J & J. Descailleaux 1986. Nuevos datos sobre la citogenética Cariográfica y relaciones de parentesco cariotípico del Género Bufo (Anfibia - Anura) en Perú I Cong. Nac. Genet. Lima Perú (Libro Resumenes) 89 Pag.
2. 1996. Tres cariotipos diferentes y uno híbrido en poblaciones naturales de Bufo marinus (Amphibia - Anura) en Perú THEOREMA UNMSM 5(7):13-(27)
3. Bogart J 1973 Method for obtaining chromosomes CALDASIA 11(52):29-40.
4. Brum Z. N. & F.A. Saz 1973. Chromosomes of south American Bufonidae (Amphibia-Anura) CALDASIA 11 (52): 51-63. 5.
5. Rodríguez M. Cordova J. & J Descailleaux 1986 Descripción del cariotipo y patrones de Bandas C en Bufo spinulosus arequipensis (Amphibia-Anura) VIII Cong. Nac. Biología Arequipa Perú.

Lámina N°01 Cariotipo del Sapo Bufo spinolosus (ANURA-BUFONIDAE), de Cusco-Perú, Metafase de Linfositos (médula osea).(Macho)

Lámina N°02 Cariotipo del Sapo Bufo spinolosus (ANURA-BUFONIDAE), ordenación de bivalentes (metafase I), división meiótica, tejido testicular.

6. Morescalchi A. 1973 Meiotic Chromosomes and their taxonomic value Amphibia - Anura. CALDASIA 11(52): 41 -50.
7. Schmid M. 1981. Chromosomes Evolution in Amphibia. In CYTOGENETICS OF VERTEBRATES. 4-47.
8. Vellard J. 1959. Estudios sobre batracios andinos. V. El Género Bufo. Memorias del Mus. Hist. Nat. J. Prado (8): Pág. 48
9. Franco N. J. S/F. Diversidad preliminar de Herpetozoos (Vertebrata), registrados para el Dpto de Cusco (Perú), (En Prensa).

Lámina N°03 Metafase del Sapo Bufo spinolosus (ANURA-BUFONIDAE), procedente del epitelio intestinal (2n=22).(Hembra)

Lámina N°04 Cariograma del Sapo Bufo spinolosus (ANURA-BUFONIDAE), mostrando 3 grupos naturales.

Lámina N°05 Idiograma del Sapo Bufo spinolosus (ANURA-BUFONIDAE)

Agradecimientos:

Los autores, expresan su reconocimientos al Dr. Santiago Saco Méndez, por su eficiente trabajo editorial y apoyo brindado, de igual manera, a los Biólogos Antonio Salas y Víctor Morales, por el desinteresado apoyo bibliográfico, de Igual manera, a David Alain Franco, Gregorio Ferro y Percy Yanque, por su apoyo de campo y toma de microfotografías.

Lámina N°06 Metafase mitótica del Sapo Bufo spinolosus (ANURA-BUFONIDAE), proveniente del Bazo.(Macho)

Lámina N°07 Metafase del Sapo Bufo spinolosus (ANURA-BUFONIDAE), proveniente del epitelio intestinal (individuo macho)

Lámina N°08 El Sapo Bufo spinolosus (ANURA-BUFONIDAE), ejemplar hembra, en vista dorsal, la barra representa la escala:4cms.

1  Centro de Estudios Biológicos "Fortunato L. Herrrera" FBC.
Universidad Nac. del Cusco (D.P. Belempampa A-8 Santiago Cusco)
(Email:Eliolturluna@hotmail.com)

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