| Ciencia e Investigación
Vol. 5 Nº 1 2002 |
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EVALUACIÓN ANTIMICROBIANA Y FITOQUÍMICA DE Lepechinia meyeni Walp "Salvia"
Cesar Rossi1, Gladys Arias A. y Nancy
Lozano R.2
RESUMEN
Se evaluó la actividad antimicrobiana del extracto metanólico y acuoso de Lepechinia
meyeni Walp. El extracto metanólico demostró actividad antimicrobiana frente a los
microrganismos gram positivos, también frente a Salmonella enteritidis y Shigella
flexneri. El screening fotoquímico determinó presencia de flavonoides, compuestos
fenólicos, taninos, terpenoides y esteroides.
Palabras claves: Lepechinia meyeni Walp, actividad antimicrobiana, fitoquímica.
SUMMARY
The antimicrobial activity of the methanol and water extracts of Lepechinia meyeni Walp
was evaluated. The methanol extract showed antimicrobial activity for gram positives
bacterias also for Salmonella enteritidis y Shigella flexneri. Phytochemical screening the
presence of flavonoid, phenolic compounds, tannins, terpenoids and steroids was determine.
Key words: Lepechinia meyeni, antimicrobial activity, phytochemistry.
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INTRODUCCIÓN
El Perú es un país rico en plantas medicinales, la medicina tradicional utilizada desde
la antigüedad ha ido acumulando conocimientos prácticos, de generación en generación,
por medios orales y escritos, constituyendo hoy en día el uso de plantas medicinales una
gran alternativa para preservar y recuperar la salud sobre todo en comunidades que están
geográfica o culturalmente aisladas.
En el Perú se cuenta con ingentes recursos naturales que requieren ser estudiados, entre
ellos están las especies nativas, muy apreciadas por los lugareños de cada zona por sus
propiedades terapéuticas.
En la presente investigación, hemos estudiado una especie de la familia Labiatae,
Lepechinia meyeni, la cual es una hierba perenne provista de tallos subterráneos, hojas
opuestas. Se encuentra en terrenos llanos y secos, en -laderas, entre 2600 y 3900 metros
sobre el nivel del mar. En el Perú está distribuida en Huánuco, Junín, Huancavelica,
Cusco, Puno y Ancash. Se conoce con los nombres comunes de salvia, pasasalvia, puna
salvia, y salvigateadora.
La planta fue recolectada en el Callejón de Huaylas, en las faldas occidentales de la
Cordillera Blanca, entre Caraz y Huaraz, Región Libertadores, Wari, donde los pobladores
las usan como infusiones de la planta entera sola o combinadas con culén y orégano
blanco para tratamientos de diarrea, cólicos, afecciones hepáticas y Como aperitivo
(1,2,3)
MATERIAL Y MÉTODOS
Material Vegetal
Las plantas usadas en este estudio fueron recolectadas en el Callejón de Huaylas, en las
faldas occidentales de la Cordillera Blanca, entre Caraz y Huaraz, Región
Libertadores-Wari. Su identificación botánica fue realizada en el Museo de Historia
Natural "Javier Prado" UNMSM.
Las especies vegetales fueron sometidas a limpieza, separación de las partes a utilizar,
estabilización, pulverización y envasado hermético en frascos ámbar.
Preparación de los Extractos
Se prepararon extractos metanólicos y acuosos de la planta estabilizada. Los extractos
acuosos fueron obtenidos por cocimiento de 20 gramos de muestra pulverizada en 100 ml de
agua destilada. Los extractos metanólicos fueron obtenidos por maceración de 30 gramos
de muestra en 100 ml del alcohol respectivo dejándose macerar por 7 días. Los extractos
así obtenidos fueron sometidos a filtración y evaporación total del solvente.
Finalmente estos extractos crudos fueron diluidos en sus respectivos solventes a una
concentración de 200 mg/ml. (4,5).
Screening Antimicrobiano
Se llevó a cabo utilizando el método disco-placa-cultivo, con discos de papel de filtro
de 6 mm de diámetro y 0,6 mm de espesor. Se utilizaron los extractos metanólico y acuoso
a 100 mg/ml. Como control fue utilizado Sulfato de Estreptomicina (500 UI/ml) y Nistatina
(500 UI/ml. Luego fueron incubados a 37 'C por 24 horas, después de lo cual se procedió
a la lectura de los diámetros de las zonas de inhibición. (6,7,8,9).
Los microorganismos utilizados fueron 13,6 bacterias gram positivas: Staphylococcus aureus
ATCC 6538, Staphylococcus epidermis ATCC 12229, Bacillus subtilis y Micrococcus luteus
UTCC 9341, Streptococcus faecalis ATCC 10536, Streptococcus beta hemoliticus; 6 gram
negativas: Escherichia coli ATCC 8739, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Shigella
flexneri, Salmonella typhi, Salmonella enteritidis ATCC y una levadura: Candida albicans
ATCC 10231.
Determinación de la concentración mínima inhibitoria
Se aplicó el mismo método utilizado en el screening antimicrobiano y los microorganismos
frente a los cuales presentó actividad antimicrobiana positiva en los ensayos de
screening.
Marcha fitoquímica
Se efectuó el ensayo fitoquímico empleando una marcha fitoquímica y técnicas de
cromatografía de capa fina, a fin de identificar los posibles grupos químicos
responsables de la actividad antimicrobiana. (10,11).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Como se observa en el cuadro N° 1, el extracto metanólico de ]a planta entera sin raíz
estabilizada de la especie Lepechinia meyeni Walp presenta actividad antimicrobiana frente
a todos los microorganismos gram positivos ensayados y a Proteus vulgaris y Shigella
flexneri.
De los cálculos de índice de actividad, como se observa en el cuadro N° 2, los
extractos metanólicos presentan índices de actividad que van desde 0,46 hasta 1,09,
mientras que los extractos acuosos presentan un índice de actividad de 0,23 hasta 0,59.
La detección de metabolitos secundarios se llevó a cabo en aquellas plantas que
presentaron actividad antimicrobiana. El ensayo fitoquímico nos muestra presencia de
flavonoides, compuestos fenólicos, triterpenos, esteroides y taninos, como se observa en
el cuadro N° 4.
Cuadro N.° 1 Determinación de la
actividad antimicrobiana de Lepechinia meyeni Walp "Salvia"
|
| MICROORGANISMO |
PLANTA ENTERA (SIN RAÍZ) |
STANDAR
D |
| M |
A |
|
| Staphylococus aureus ATCC |
++ |
- |
++++ |
| Staphylococus epidermidis ATCC |
++ |
+ |
++++ |
| Bacillus subtilis (*) |
++ |
+ |
+++ |
| Micrococcus luteus ATTC |
+++ |
+ |
+ |
| Streptococcus faecalis
ATCC |
+ |
- |
- |
| Streptococcus beta hemoliticus
(*) |
+++ |
+ |
++ |
| Escherichia coli ATCC |
- |
- |
++ |
| Proteus vulgaris (*) |
++ |
- |
- |
| Psedomonas aeruginosa (*) |
- |
- |
- |
| Shigella flexneri (*) |
++ |
+ |
+ |
| Salmonella typhi (*) |
- |
- |
++ |
| Salmonella enteritidís ATCC (*) |
- |
- |
++ |
| Candida albivans |
- |
- |
+++ |
Clasificación
de los resultados: 6 mm de zona de inhibición;
+, 7-8 mm; ++, 9-13 mm; +++ 14-18; ++++.
E, extracto etanólico; M, extracto metanólico.
(*) Cepas proporcionadas por NAMRID |
Cuadro N.° 2 Índice de actividad
de los extratos vegetales de Lepechinia Walp "Salvia"
|
| Extractos
vegetales |
CEPA |
Extracto
metanolico |
Estándar
estreptomicina |
Extracto
acuoso |
| ZI (mm) |
IA |
ZI(mm) |
ZI (mm) |
IA |
| Lepechina meyeni
(Planta sin raíz) |
Staphylococcus aureus |
13 |
0,81 |
16 |
- |
- |
| Streptococus beta hemolíticus |
- |
- |
- |
6,5 |
- |
| Bacillus subtilis |
13 |
0,46 |
28 |
6,5 |
0,23 |
| Proteus vulgaris |
10 |
0,62 |
16 |
7 |
0,43 |
| Shigella flexneri |
12 |
1,09 |
11 |
6,5 |
0,59 |
| ZI, Zona de
inhibición: IA, índice de actividad: mm, milímetro |
Cuadro N.° 3
Concentración mínima inhibitora
|
Concentración
mínima inhibitora (mg/ml) |
| Microorganismo |
Lepechinia meyeni
(Planta sin raíz) |
| Staphlococcus aureus ATCC |
5 |
| Bacillus subtilis |
2,5 |
| Streptococcus beta hemoniticus |
2,5 |
| Shigella flexneri |
5 |
Cuadro N.° 4
Ensayo fitoquímico
|
Especie vegetal
|
Lepechinia
meyeni
(Planta sin raiz) |
| Componentes |
| Flavonoides |
++ |
| Cumarinas y/o sesquiterpenos |
- |
| Compuestos fenólicos |
++ |
| Alcaloides |
- |
| Triterpenos y/o esteroides |
++ |
| Saponinas |
+ |
| Taninos |
++ |
| No detectable, -; escaso,
+; moderado, ++; adundante, +++ |
CONCLUSIÓN
Los resultados nos permiten concluir que el extracto metanólico de la planta sin raíz
estabilizada de Lepechinia meyeni presenta actividad antimicrobiana frente a todas las
bacterias gram positivas ensayadas.
El extracto metanólico de planta entera sin raíz estabilizada de Lepechinia meyeni
presenta actividad frente a Shigella flexneri y a Proteus vulgaris.
El ensayo fitoquímico nos muestra presencia de flavonoides, compuestos fenólicos,
triterpenos, esteroides, saponinas y taninos.
Bibliografía
1Instituto de Investigación en
Ciencias Farmacéuticas y Recursos Naturales, Terapéuticos. Facultad de Farmacia y
Bioquímica Universidad Nacional Mayor de San Marcos
2Laboratorio de Bromatología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la
Universidad Nacional Mayor
de San Marcos
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