INTRODUCCIÓN Los rizomas de Curcuma longa recolectados en la localidad de Pucalpa por extracción etanólica en frío, producen por lo menos tres curcuminoides coloreados estimados mediante cromatografía en capa fina y eromatografía líquida de alta performance HPLC (Fig. 1). Cada colorante ha sido aislado mediante cromatografía en columna y las estructuras analizadas por espectroscopía IR (Fig. 2). El modelo de estructura de la curcumina y los curcuminoides similar a los carotenoides hace suponer que las insaturaciones pueden absorber oxígeno y radicales libres, además de implicar un mecanismo antiinflamatorio (Fig. 3). En conexión con los trabajos de MISRA y col (1972) acerca de la comparación de la actividad antiradicálica de la enzima superóxido dismutasa correlacionada con la oxidación o autooxidación de la epinefrina; y el trabajo de SREEJAYAN y col (1997) que utiliza el óxido nítrico para comprobar la acción antioxidante de estructuras químicas, es posible establecer el comportamiento de los curcuminoides.
MATERIAL Y MÉTODOS Los colorantes fueron desecados en un equipo de liofilización de los Laboratorios LBM Colichón. Los cromatogramas HPLC se determinaron en un equipo Perkin Elmer con columnas LiChrosorb RP 18 250 x 4 mm i.d. y Zobaz Ods 250 x 4,6 mm i.d. Los espectros IR fueron registrados en espectro fotómetro Perkin Elmer 257. Las lecturas de la oxidación de epinefrina y de su inhibición fueron determinados en un espectrofotómetro Milton Roy Spectronic 201). - Determinación del efecto antiinflamatorio Modelo: Edema plantar en ratas inducido por carragenina descrito por Winter et al. modificado por Sughisila et al. (1981).
- Determinación de la actividad antiradical libre (antioxidante) Se ensayó con el pigmento amarillo naranja y con el extracto total en metanol de Curcuma longa. Condiciones de trabajo: la oxidación de la epinefrina se produjo a pH 10,2 en una mezcla de reacción que contiene 3 x 10-1 M de epinefrina, 1 x 10-4 M de EDTA y buffer de carbonato de sodio a pH 10,2 y 0,05 M incubado a 30º C por 1 minuto. La muestra problema disuelta en metanol fue sometida a las mismas condiciones de trabajo y sobre la mezcla anterior. Tanto el comportamiento de la curcumina como del extracto fueron seguidos leyendo las absorbancias a 480 nm durante 5 minutos.
RESULTADOS Los resultados en la determinación de la acción antiinflamatoria se observa en las figs. 4 y 5, donde se puede apreciar la acción de la curcumina, del extracto total y de un curcuminoide, comparado con el efecto del piroxicam y la dexametasona. Los resultados están expresados en la disminución de la inflamación. La disminución de la inflamación se produce a una dosis de 125 mg/kg de peso con la curcumina, dando lugar a una disminución de la inflamación equivalente al 27,5%, con respecto al grupo blanco (Figs. 6 y 7). En la determinación de la acción antiradical libre (antioxidante) se produjo buenos resultados con el extracto total disuelto en metanol y mejor con la curcumina. El color rojo que se produce por autooxidación de la epinefrina es inhibido por el extracto y por la curcumina (Fig. 8).
DISCUSIÓN Los curcuminoides de los rizomas de Curcuma longa, presentan acción antiinflamatoria, especialmente la curcumina. La administración subcutánea de carragenina a nivel de la aponeurosis plantar de la rata provoca una reacción de carácter inflamatoria, mediada por la liberación de autacoides, se evidencia entonces la formación de un edema. Este se mide mediante un pletismómetro, la diferencia de volúmenes (AV) de la pata inflamada con respecto al basal normal controlada cada hora representará el curso de la inflamación. El AV de la pata del animal tratado con la droga en estudio se compara porcentualmente con el AV del animal control a la misma hora. Para el control se usó piroxicam y dexametasona. En cuanto a la acción antiradical libre, por el hecho de que el ensayo es semejante a la acción de la enzima superóxido dismutasa contra el radical libre superóxido y estudiado en paralelo con SODM y epinefrina, se ha comprobado fehacientemente que la curcumina o el extracto inhibe fuertemente la auto oxidación de la epinefrina a pH 10,2. La epinefrina a pH 10,2 se oxida hacia adenocromo de color rojo cuya máxima absorción es de 480 nm. La oxidación que es rápida se protege en presencia de curcumina y del extracto metanólico de Curcuma longa (Fig. 8).
CONCLUSIONES 1. El curcuminoide curcumina a la dosis de 125 mg/kg de peso tiene una actividad antiffillamatoria de disminución de la inflamación del 27,5% a la cuarta hora con respecto al grupo blanco. 2. En extracto posee hasta 55% de disminución de la inflamación. 3. No tiene acción analgésica. 4. La curcumina y el extracto metanólico de Cúrcuma longa inhibe fuertemente la autooxidación de la epinefrina, por lo tanto tiene una acción antiradical libre igual a la enzima superóxido dismutasa (SOD).
REFERENCIAS BIBLIOBRÁFICAS 1. Manual de Técnicas de Investigación CYTED Programa Iberoamericano de Ciencias y Tecnología para el Desarrollo 1995.2. GOODMAN GILMAN A. Las Bases Farmacológicas de la Terapéutica. Vol. I. Novena Edición Editorial McGRAW-HILL INTERAMERICANA México, 1996. 3. MISRA HARA P.; FRIDOVICH I. J. Biological Chem. 247 (10), 3170-3175, 1972. 4. SREEJA Y.; RAO M.N.A. J. Pjarm. Pharmacol. 49, 105-107, 1997.
Valor de DV obtenidos del ensayo con las
diferentes muestras y estándares
* Instituto de Química Orgánica Aplicada a la Farmacia, UNMSM
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