AISLAMIENTO DE ACANTHAMOEBA EN ACANTHAMOEBA EN PACIENTES DEL SERVICIO E OFTALMOLOGÍA DEL HOSPITAL NACIONAL CAYETANO HEREDIA

Roxana Suárez1, Juan Olaya2, Pedro Huapaya3, Elba Miranda4, César Náquira5.

INTRODUCCIÓN

Las amebas de vida libre son un grupo de protozoos anfizoicos causantes de enfermedades en el ser humano, que afectan preferentemente al sistema nervioso central, reportándose, además, infecciones cutáneas en individuos inmunosuprimidos y queratitis en sujetos inmunocompetentes (1-5). Con relación a esto último, estos microorganismos han sido encontrados contaminando tanto lentes de contacto como la solución utilizada para el lavado de esos lentes, señalándose este hecho como un factor de riesgo importante para esta patología (6).

La enfermedad se inicia en forma insidiosa, produciendo dolor ocular (1,3,4,7), que, de no ser tratada a tiempo, puede producir úlceras en la córnea que llevan a la disminución progresiva de la agudeza visual, llegando inclusive hasta la ceguera (1,2).

Los factores de riesgo descritos por diversos autores incluyen, entre otros, traumatismo corneal, exposición al agua contaminada y el uso de lentes de contacto, los cuales permiten el ingreso del parásito al organismo humano (1,8). Asimismo, la falta de higiene en la preparación y conservación de algunas soluciones de lavado es reconocida también como el factor de mayor importancia entre los usuarios de lentes de contacto. Diversos estudios determinan que este antecedente se presenta en 85% de los casos reportados (1,6,9).
Las investigaciones señalan seis especies del género Acanthamoeba que han sido identificadas como causantes de queratitis; entre ellas tenemos A.castellani, A.culbertsoni, A.hatchetti, A. polyphaga (1,10), A. rhysodes (11,12), A. lugdinensis (13) y A. palestinensis (14).

El presente trabajo tiene como objetivo determinar la presencia de amebas de vida libre en muestras de hisopados corneales tomados de individuos que acudieron al Servicio de Oftalmología por diversos motivos de consulta, pero sin evidencia de lesión corneal alguna, para establecer si la presencia de los parásitos indicaría una mayor posibilidad de desarrollar infecciones oculares, como la queratitis, al estar presentes esperando el momento oportuno para ingresar al tejido y producir la lesión característica. 

MATERIAL Y MÉTODOS

Se realizó un estudio en 100 individuos sin evidencia de lesión corneal que acudieron al Servicio de Oftalmología del Hospital Nacional Cayetano Heredia, con la finalidad de determinar la presencia de amebas de vida libre del género Acanthamoeba, importante agente causal de queratitis.

Las muestras de hisopado corneal fueron recolectadas durante los meses de abril y mayo de 1999.

Se utilizó una ficha epidemiológica en cada individuo, en la cual se anotó datos personales, sintomatología y factores asociados, tales como el contacto con agua potencialmente contaminada (río, pozo y piscina), el material predominante en la vivienda, el uso de lentes de contacto, entre otros. Para el transporte y conservación de la muestra se utilizó un frasco estéril con solución amebosalina (solución utilizada para el cultivo de amebas de vida libre). Una vez en el laboratorio, los hisopos estériles fueron colocados en placas petri conteniendo agar napolitano y agar no nutritivo al 2%, junto con una suspensión de bacterias muertas (Escherichia coli), siendo observadas después de 7 días. Para esto, se agregó solución fisiológica a cada placa, frotando con un asa metálica la superficie, para liberar todas las colonias presentes. Luego se retiró una alícuota de 20uL para colocarla entre láminas portaobjetos y cubreobjetos. Se observó en microscopio a 100 y 400 aumentos. 

Las muestras fueron consideradas positivas al encontrarse en uno de los medios de cultivo al menos un quiste con las características morfológicas del género Acanthamoeba (forma circular o poligonal, doble membrana).

RESULTADOS 
En los 100 individuos estudiados, se encontró 16 casos positivos (16%) (Tabla 1). Asimismo, 44 (44%) individuos fueron de sexo masculino; de ellos, 8 (22,2%) resultaron positivos, mientras que entre 56 (56%) de sexo femenino, 8 (14,3%) resultaron positivos. Estas diferencias no son estadísticamente significativas (Tabla 2).

Con relación a la distribución por edades, 27% de los sujetos fue menor de 10 años y, si ampliamos el grupo hasta los menores de 20 años, entonces la proporción aumenta a 63%, lo cual constituye un hallazgo sumamente importante, pues muestra cómo la población con trastornos oftalmológicos es predominantemente joven. Esta distribución se mantiene si separamos los pacientes según el resultado obtenido en el cultivo. Así tenemos que, dentro de los menores de 10 años, 22,2% son positivos, mientras que entre los 11 a 20 años, 13,8% son positivos. Si comparamos con el total del grupo mayor de 21 años, la proporción de sujetos positivos es 13,5%, es decir, se muestra una tendencia a la mayor frecuencia de la infección en sujetos jóvenes, predominando la etapa escolar (Tabla 3).

De 89 individuos con información epide-miológica y resultado de cultivo, 42,7% tenía instrucción primaria y 57,3% instrucción secundaria. Ninguno alcanzó instrucción superior. Además, comparando la distribución de los resultados entre estas categorías, 20,1% de aquellos con instrucción primaria fueron positivos mientras sólo 13,7% de aquellos con instrucción secundaria. Esta situación debe ser estudiada con mayor amplitud.

Como era de esperarse, por la distribución de edades del grupo de estudio, la mayoría (74%) fue nativo de las ciudades de Lima y Callao, así como 65,7% de la población estudiada provenía del Cono Norte de la Ciudad, siendo este hecho consecuencia directa de la ubicación del Hospital Nacional Cayetano Heredia.

En la búsqueda de un factor asociado a la presencia del parásito, se obtuvo que 89 pacientes informaron con respecto a antecedentes de viajes a zonas en donde la infección había sido anteriormente descrita (Piura, Ica). Encontramos que 61,8% refirió viajes fuera de la ciudad de Lima. Sin embargo, de ellos 52,7% había visitado alguna ciudad de la sierra, mientras que 43,6% lo hizo en las ciudades de la costa. Entre aquellos que resultaron positivos, 12,5% visitó ciudades de la costa y 17,2% de la sierra. Estos resultados nos indicarían la amplia distribución del parásito. Además, se obtuvo información de 58 sujetos acerca del contacto con fuentes de agua extradomiciliaria, quienes manifestaron haberse bañado principalmente en piscinas (70,7%) y en el río (22,4%). Las proporciones de positivos en cada caso fueron 12,2% y 7,7% respectivamente. Podemos estimar que el antecedente no es lo suficiente fuerte como para considerarlo como un factor de riesgo, al menos en la población estudiada (Tabla 4). 

En cuanto a las condiciones intradomici-liarias, de 76 sujetos que brindaron información sobre el material predominante en sus viviendas, 89,5% refirió que era de material noble, hecho esperable, ya que la procedencia de los pacientes era predominantemente urbana. Esta situación tampoco brinda mayores luces sobre la relación con el riesgo de infección. Asimismo, se obtuvo información de la fuente de provisión de agua para la vivienda; 63,2% obtenía el agua de camiones cisternas y 25% de pozos; 11,8% refirió otras fuentes, como conexión intradomiciliaria. Si, además, comparamos con la proporción de positivos, en cada situación obtenemos resultados interesantes, ya que de aquellos usuarios de pozos 31,6% fue positivo, mientras que de los usuarios de camiones cisternas sólo 12,5% fue positivo; aquellos usuarios de otras fuentes, tuvieron solamente 11,1% de casos positivos (Tabla 5).

Con relación al diagnóstico oftalmológico, el principal de ellos fue ametropía (43,8%). Las infecciones más frecuentes fueron conjuntivitis (16,4%) y blefaritis (12,3%), afecciones frecuentes en el grupo de edad estudiado, que como ya se ha mencionado corresponde básicamente a menores de 20 años.

DISCUSIÓN

El hallazgo de amebas de vida libre del género Acanthamoeba en 16% de individuos de un grupo de 100 pacientes de un servicio de oftalmología sin evidencia de lesión corneal, nos indica que la presencia de este agente infeccioso es importante, aún en sujetos en quienes no existe la sospecha clínica. Esto los predispone a sufrir consecuencias muy graves, en caso de presentar alguna lesión adicional que permita la entrada del parásito al tejido.

Algunos estudios señalan que la queratitis está asociada con traumatismos corneales, que son considerados como la principal puerta de entrada (15). Sin embargo, existen reportes de Visvesvara en 200 pacientes con queratitis, usuarios de lentes de contacto, que no presentaban traumatismo corneal alguno, asociando la enfermedad con las soluciones de limpieza que se utiliza comúnmente para los lentes de contacto; éstos podrían contaminarse fácilmente con quistes provenientes del aire (16).

Este hallazgo concuerda con el reporte del aislamiento de amebas de vida libre a partir de la región nasofaríngea en individuos sin síntomas de enfermedad (12,17). Ello indica que el ser humano está expuesto a este microorganismo en forma continua. Estos hallazgos no deben ser sobrestimados, ya que dichas amebas no sólo presentan un potencial infeccioso sino que también pueden servir como vector para otras especies patógenas para el hombre (18,19).
Con respecto al grupo etario, 62,9% de los individuos estudiados eran jóvenes, principalmente menores de 20 años. Los sujetos positivos también eran predominantemente de esta edad, lo que concuerda con algunas características de los pacientes que sufren de queratitis, que son con mayor frecuencia jóvenes y sanos. Ello no excluye que esta enfermedad pueda afectar a individuos de cualquier edad.

Existen reportes acerca de 10 casos de queratitis debido a Acanthamoeba castellani y Acanthamoeba polyphaga, en los cuales, el rango de edad de los individuos osciló entre los 23 y 59 años (19). Así mismo, Campello y col reportan que en 21 pacientes con queratitis, la media de la edad fue de 32 años (rango de 9 a 53 años), siendo la ocupación más frecuente la de estudiante en 7 casos (30%); 14 pacientes (66,7%) fueron mujeres y 7 (33,3%) hombres (20), resultados que concuerdan con los hallados en el presente trabajo, puesto que la presencia del parásito fue más frecuente entre las mujeres, no observándose diferencias significativas.

En cuanto a los factores asociados a la presencia del parásito en el grupo estudiado, 61,8% manifestó haber viajado alguna vez fuera de Lima, de los cuales 8 % fueron positivos. Sin embargo, sólo 12,2% visitó la costa y 17,2% la sierra, mostrando así la amplia distribución del parásito en la naturaleza, tal como ha sido reportado en otro estudio realizado en nuestro país, en el que se aisló Acanthamoeba en muestras de agua en la mayoría de los departamentos. Aunque la metodología utilizada fuera discutible, se mostró el riesgo potencial, por la amplia distribución del parásito (20). 

Entre los factores de riesgo, la mayor parte de los pacientes positivos era usuario de pozos y cisternas como fuente de abastecimiento de agua domiciliaria, utilizando dichas aguas en la cocina e higiene personal. Los pozos y cisternas en nuestra capital adolecen de las mínimas condiciones sanitarias que garanticen higiene y seguridad necesarias para la población. Ello concuerda con reportes en el Reino Unido, en donde vinculan la queratitis con el empleo de depósitos de agua de uso doméstico (21). Así también, en un reporte nacional se aisló Acanthamoeba en fuentes de agua de uso doméstico y también en fuentes naturales (20).
En cuanto al contacto con agua potencialmente contaminada proveniente de ríos y piscinas, en el grupo estudiado no resultó ser un factor importante, por la poca frecuencia de presentación. Lo cual no concuerda con los reportes de Losada y col., quienes señalan que entre los factores asociados con la infección por Acanthamoeba se incluye a los usuarios de lentes de contacto, quienes utilizan soluciones caseras, sistemas de desinfección y/o exposición a agua de piscinas o corrientes (6). 


Bibliografía

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¹Facultad de Medicina, Universidad Nacional Mayor de San Marcos. 
²Hospital Cayetano Heredia. 
³Instituto de Medicina Tropical “Daniel A. Carrión”. 
⁴Sección de Parasitología. Universidad Cayetano Heredia. 5Instituto Nacional de Salud.

Correspondencia:
Dr. Pedro Huapaya Herreros
Av. Oscar R. Benavides 5050 – Dpto. 204
Callao 02, Perú
E-mail: pehh@terramail.com.pe

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