Resistencia in-vitro del Vibrio cholerae 01 a Nueve Antimicrobianos en la Provincia Constitucional del Callao. Abril - Junio 1998 JOSÉ MARíA GUEVARA-GRANADOS, DORA
GIRALDO, ELVIRA MEZARINA y NICOLÁS VELARDE RESUMEN OBJETIVOS: Determinar los niveles actuales de resistencia in vitro del Vibrio cholerae a ciertos agentes antimicrobianos. MATERIALES Y MÉTODOS: Se estudió la resistencia in vitro por el método de disco-difusión en 225 cepas de Vibrio cholerae 01 aisladas a partir de coprocultivos tomados a pacientes del Hospital Daniel A. Carrión y otros establecimientos de salud del Callao, como parte de la Vigilancia Epiderniólógica del Programa de Enfermedad Diarreica Aguda y Cólera. RESULTADOS: Se obtuvo una resistencia promedio total de 24,7% a Ampicilina, 18,7% a Tetraciclina, 8% a Cotrimoxazol, 7,5% a Cefalotina, 5% a Cloramfenícol, 2,25% a Furazolidona, 1% a Ácido Nalidíxico, 0,5% a Norfloxacino y no se observó resistencia a Ciprofioxacino. Se encontró además 17,3% de resistencia a 2 ó más antimicrobianos, siendo más frecuente la resistencia a 2 agentes. CONCLUSIONES: Observamos un porcentaje mayor de resistencia antimicrobiana del Vibrio cholerae 01 respecto a años anteriores, particularmente a Ampicilina y Tetraciclina. Las quinolonas continúan siendo una alternativa de tratamiento en casos particulares de resistencia. Palabras claves: Vib.rio cholerae; Cólera; Antobióticos; Resistencia a la Tetracíclina; Diarrea. In vitro RESISTANCE OF Víbrio cholerae 01 AGAINST 9 ANTIMICROBIAL AGENTS IN CALLAO - PERU, APRIL - JUNE 1998 SUMMARY OBJECTIVE: To determine the current levels of in vitro resistance of Vibrio cholerae strains against different antimicrobial agents. MATERIALS AND METHODS: The in vitro resistance of 225 Vibrio cholerae strains isolated from stool cultures taken from patients at the "Hospital Nacional Daniel A. Carrión" and other health care centers of Callao, Peru, as part of the Epiderniologic Surveillance of the Acute Diarrheic Diseases and Cholera Programme,was assessed by disc-difusion method. RESULTS: Resistance patterns obtained were the following: 24,7% to ampicillin, 18,7% to tetracyclin, 8% to cotrirnoxazol, 7,5% to cephalotin, 5% to cloramphenicol, 2,25% to furazolidone, 1 % to nalidixic acid, 0,5% to norfloxacin and no resistance was observed to ciprofioxacin. It was also found 17,3% of cases with resistance to 2 or more antimicrobial agents. CONCLUSIONS: Antimicrobial resistance patterns of Vibrio cholerae are increasing in last years. Quinolones are still good therapeutic options in particular resistance cases. Key words: Vibrio cholerae; Cholera; Antibiotics;
Tetracycline Resistence; Diarrhea. INTRODUCCIÓN La Enfermedad Diarreica Aguda (EDA) puede ser causada por diferentes agentes etiológicos, entre los que se incluyen diversas bacterias. Con la llegada del Vibrio cholerae al Perú en el año 1991, esta bacteria se ha convertido en uno de sus principales agentes etiológicos. Los Vibrios son bacterias que no adquieren resistencia a los antimicrobianos tan fácilmente como lo hacen las Enterobacterias. Desde 1991 se viene utilizando algunos antimicrobianos con el finde interrumpir la cadena epidemiológica y la duración de la enfermedad, lo que podría motivar la aparición, aunque difícil, de patrones de resistencia a más agentes antimicrobianos de lo inicialmente considerado. El presente trabajo se realizó con el objetivo de determinar la resistencia actual in vitro del Vibrio cholerae a ciertos agentes antimicrobianos, se ha realizado. MATERIALES Y MÉTODOS Durante los meses de abril a junio de 1998 se realizó pruebas de sensibilidad antimicrobiana a las cepas aisladas de Vibrio cholerae 01 obtenidas a partir de coprocultivos e hisopados rectales provenientes del Sistema de Vigilancia del Programa de Enfermedad Diarreica Aguda y Cólera que provenían de diferentes Centros y Puestos de Salud del Callao; asimismo, se obtuvo muestras de pacientes atendidos en el servicio de Emergencia del Hospital Nacional Daniel A. Carrión. Los hisopos y una pequeña fracción de heces fueron depositados en tubos que contenían agua peptonada alcalina, e incubados a 37'C por 6 horas, luego de lo cual fueron resembrados en el medio selectivo agar TCBS. Cuando se desarrollaban colonias amarillas, se procedió a hacer estudios de diferenciación bioquímica y confirmación serológica. Las cepas confirmadas de Vibrio cholerae 01 se sometieron a la prueba del antibiograma por el método de disco-difusión estandarizado por Bauer, Kirby y col. a los siguientes antimicrobianos: Ampicilina (A), Tetraciclina (T), Cefalotina (Cf), Cloramfenicol (Clor), Cotrimoxazol (Cot), Furazolidona (Fur), Ácido Nalidíxico (Ac.Nal), Norfloxacino (Nor) y Ciprofioxacino (Cip). En vista de que los resultados calificados de moderadamente sensibles, pueden en realidad ser sensibles (lo cual podría definirse determinando la mínima concentración inhibitoria), sólo consideramos los resultados que fueron clasificados como resistentes en la prueba de disco-difusión. No todas, las cepas fueron evaluadas con los nueve antibióticos al mismo tiempo, por algunos inconvenientes logísticos. RESULTADOS Durante los 3 meses que duró la recolección de muestras, se aislaron 225 cepas de Vibrio cholerae 01, todas fueron biotipo El Tor, serotipo Ogawa. Los antimicrobianos para los que se
encontró los niveles de resistencia más altos fueron Ampicilina (24,7%) y Tetraciclina
(18,7%), mientras que los menores niveles de resistencia se observó entre las quinolonas,
no hallándose cepas resistentes a Ciprofioxacino. En la Tabla N° 1 se aprecian los
patrones de sensibilidad y resistencia a los diferentes antimicrobianos estudiados.
De las 225 cepas, 39 (17,3%) tuvieron resistencia a 2 ó más antimicrobianos, siendo la más frecuente la de 2 antibióticos, tal como se muestra en la Tabla N° 2.
El patrón de resistencia más frecuente a 3 antimicrobianos fue Cotrimoxazol + Cloramfenicol + Tetraciclina. Asimismo, hubo una cepa resistente a 4 antimicrobianos, una cepa a 5 antimicrobianos y una cepa a 6 antimicrobianos a la vez (Tabla N° 4). DISCUSIÓN Perú es un país donde el cólera se ha hecho endémico; tenemos 7 años de convivencia con el Vibrio cholerae y tal vez dentro de un tiempo veamos el carácter endémico apreciado en otros países como en Bangladesh, donde el 80% de cepas aisladas en 1992 fue resistente a Cotrimoxazol y Tetraciclina y el 100% lo fue a Ampicilina, por lo que ahora el tratamiento lo realizan con Eritromicina (1). En la India se apreció un aumento en la resistencia al Cotrimoxazol que llegó al 81,5% y la mayoría de cepas fue también resistente a Tetraciclina (1). En los antibiogramas de Vibrio cholerae que se realizaron en 1991, cuando recién llegó la epidemia, no se encontró ninguna resistencia, tal como se menciona en los trabajos publicados ese año por Guevara Duncan y col. (1). Recién en 1992 se reportó 1,2% de resistencia a Ampicilina (1). En otro trabajo de Guevara y col. en 1993, se reportó 8,4% de resistencia a Ampicilina, 3,3% para Tetraciclina, 3,0% para Cotrimoxazol, 0,6% para Furazolidona y ninguna para Norfloxacino (1). Nosotros hemos encontrado que en estos años la resistencia ha aumentado en relación con reportes previos (3-5). No tenemos los altos valores de resistencia que se observan en otros países donde el cólera es endémico (1), tal vez por el corto tiempo que éste está entre nosotros; pero ya está empezando a observarse resistencia. Del 17,3% de resistencia múltiple encontrado, el tipo más frecuente fue a 2 antimicrobianos, siendo Cotrimoxazol + Tetraciclina la asociación más frecuente, que es la misma asociación que se reportó en Bangladesh pero en un 80% (1). CONCLUSIONES Observamos un incremento de la resistencia en relación a lo reportado en los últimos años, no sólo para un agente antimicrobiano determinado, sino también a múltiples agentes. Los antimicrobianos para los que se encontró mayores niveles de resistencia fueron Ampicilina y Tetraciclina. Las quinolonas siguen siendo una alternativa a considerar en casos particulares de resistencia. Para no tener los problemas de resistencia que afrontan otros países en donde la enfermedad es endémica, aconsejamos enfatizar en el uso racional de antimicrobianos, a fin de no incrementar aún más el nivel de resistencia.
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