SEROPROVALENCIA DE LEPTOSPIROSIS EN HUMANOS 
Y RESERVORIOS EN LA LOCALIDAD DE KORIBENI.
 LA CONVENCIÓN, CUZCO.

PAUL PACHAS, ROBERTO CJUNO, MIJHAIL PORTUGAL, BETTY TABOADA,
VIDAL FELICES, V. ALBERTO LAGUNA-TORRES

RESUMEN

Del 5 al 16 de julio de 1998 personal del Ministerio de Salud (MINSA) viajó a la comunidad de Koribeni (Echerate-Cusco) a fin de determinar la seroprevalencia de infección por Leptospira en humanos y animales (domésticos y silvestres), conocer la magnitud del problema, los posibles reservorios y los serovares predominantes. Se tomaron muestras de animales domésticos, peridomésticos y se capturaron ratas y marsupiales. la muestras se procesaron en el INS mediante aglutinación macroscópica (tamizaje) y aglutinación microscópica (MAT). Para los cultivos se usó el medio Fletcher. De 164 muestras humanas, 41 (25%) presentaron anticuerpos contra Leptospira interrogans. El serovar prevalente fue Autumnalis (31%) seguido de Diasiman (11%), Batavice (9.25%) y otros (48.75%). En 33 muestras de sangre canina, 12 (36.4%) fueron positivas, el serovar prevalente fue Autumnalis (27.8%) seguido de Australis (16.6%), Pomona (16.2%) y otros (39.4). Los cultivos (33) fueron negativos (suero y órganos correspondientes a 18 animales entre ratas, cuyes y marsupiales). El género Autumnalis fue prevalente en humanos y canes lo que presupone que puedan ser éstos los reservorios que brinden la infección a los humanos. llamó la atención la ausencia del serovar canícola en los sueros estudiados. La leptospirosis ha sido considerada dentro de la vigilancia del síndrome icterohemorrágico que el MINSA ha iniciado en Cusco, Huánuco y Ayacucho.

Palabras llave: leptospirosis, zoonosis, seroprevalencia

SUMMARY

On July 5-16,1998, Peru's Ministry of Health (MINSA) team, tripped lo Koribeni community (Echerate - Cusco) in order lo determinate leptospira's infection seroprevalence in humans and animals (domestic and wild), known the magnitude of this problem, the reservoirs and the predominant serovar. Animals samples of rais and marsupials were collected by the team. That samples were processed by the National Institute of Health by screening macroscopic agglutination and microscopic agglutination (MAT). All the culture were inoculated in Fletcher's medium From 164 human samples Leptospira interrogans antibody's were found in 41(25%).The prevalent serovar was Autumnalis (31%) and Djasiman(11%), Botaviae (9.25%) and others (48.75%) were also identificated. From 33 canine blood samples, 12 (36.4%) were positives, the prevalent serovar was Autumnalis (2T8%) and Australis (16.6%), Pomona (16.2% and others (39.4%) were too identificated. Al¡ 33 cultureswerenegatives (sera and organs from 18 animals). The serovar Autumnalis was prevalent in humans and dogs and maybe that animals were the reservoirs implicated in that region. Unusual absence of serovarcanícola tacked special attention. Leptospirosis had been considered by the MINSA Icterohaemorraghic syndrome surveillance initiated in Cusco, Huánuco y Ayacucho.

Keys words: leptospirosis, zoonosis, seroprevalence


INTRODUCCION

La leptospirosis es una zoonosis de distribución mundial, afecta a mamíferos domésticos y silvestres. Los seres humanos se infectan accidentalmente a través del contacto directo o indirecto con la orina de estos animales, a través del agua o suelos contaminados. Se reconocen más de 200 serovares de L. interrogans que son patógenas; mientras que las leptospiras saprófitas de vida libre son de la especie biflexa. En todo el mundo las ratas constituyen la fuente más común de transmisión de la infección para los humanos.

En nuestro país los estudios de Herrer y Liceras han mostrado la distribución de serovares de Leptospira en diversas áreas, también la relación entre animales infectados y serología en humanos así como la prevalencia de la leptospirosis en las poblaciones estudiadas. En el Perú, durante las dos últimas décadas se han registrado pocos datos sobre la distribución de la enfermedad, reservorios ecológicos y su prevalencia en humanos y animales domésticos y silvestres.

Sin embargo se ha reportado anteriormente la presencia de animales y humanos infectados en diferentes poblaciones estudiadas. En abril de 1998 el Instituto Nacional de Salud (INS) recepcionó 24 muestras séricas enviados por la Oficina General de Epidemiología (OGE) provenientes del distrito de Echerate, provincia de la Convención, Cusco. En 5 de ellas se encontraron títulos de anticuerpos IgM considerados positivos contra Leptospira.

En mayo del mismo año un equipo de intervención rápída integrado por personal del la OGE y el INS investigó un brote de una enfermedad caracterizada por presentar sintomas de una infección respiratoria aguda en una comunidad nativa Machiguenga localizada en el disirilo de Echerate, Cusco, los resultados de laboratorio demostraron incremento de títulos de anticuerpos IgM positivo para leptospirosis por el método de ELISA en 16 de las 42 muestras de suero colectadas. Además, por el cuadro clínico presentado se realizaron pruebas serológicas para descartar hepatitis, dengue y fiebre amarilla. Se reportó la defunción de una niña con diagnóstico clínico, pero sin confirmación serológica.

En años anteriores no se habían reportado casos confirmados de leptospirosis procedentes del distrito de Echerate, por lo que se consideró que existía un brote en el área y se decidió investigar las características del mismo.

El objetivo del presente trabajo fue determinar la seroprevalencia de infección por Leptospira en humanos, animales domésticos y roedores sinantrópicos y silvestres en la localidad de Koribeni, distrito de Echerate, Provincia de la Convención, para conocer la verdadera magnitud del problema, los posibles reservorios y los serovares predominantes, para implementar medidas de prevención y control.

METODOLOGIA
El estudio se realizó del 5 al 16 de julio de 1998 por un equipo integrado por personal de la OGE, Programa de Control de Zoonosis, INS, Dirección de Salud (DISA) Cusco, Hospital de Quillabamba, Puesto de Salud (PS) de Koribeni y una mastozoólogo de la Universidad de Texas que se encontraba en el pais. La comunidad nativa de Koribeni esta localizada en el distrito de Echerate, provincia de la Convención, Cusco (Figura l), tiene una población de aproximada mente 2 500 habitantes; sus principales actividades económicas son el cultivo de café, cacao y frutos y en menor escala la ganadería. Cuento con un colegio de primaria, otro de secundaria y un Puesto de Salud.

Se confeccionó un mapa de la localidad con la ubicación de las viviendas y las familias. Seguidamente se conformaron tres grupos, en cada uno se incluyó una persona del nivel local para el mejor entendimiento con la población. las comunidades visitadas fueron: Alto Koribeni, Bueno Vista, Piyoto, Misión Koribeni, Confianza, Bajo Kimaricito, Simbeni y Polo Sontuyoc. La distancia del PS hacia las comunidades es varicible desde 20 minutos hasta tres a cuatro horas a pie.

Estudio en humanos
Se visitó cada una de las viviendas de las comunidades explicando al jefe de familia los objetivos del estudio, previa aceptación de participar en forma volunlaria.

Se elegía por un muestreo aleatorio simple a un miembro de la familia y se colectaban los datos necesarios en una ficha de investigación clinicoepidemiológica posteriormente se le extraía una muestra de sangre venoso de 5 ml con un tubo vacutainer sin anticoagulante, que era codificado con un número correlativo seguido de la letra H (humano) y transportada en un termo a 4-8 ºC al PS, donde era centrifugado. Los sueros sobrenadantes fueron mantenidos a 4 ºC hasta su procesamiento en el INS. Cada muestra de sangre era acompañado por la respectiva ficha en la que se incluían, además, preguntas sobre conocimientos, actitudes y prácticas del individuo (los cuales son motivo de otra publicación), frente a la enfermedad y algunos posibles factores de riesgo. Las visitas se realizaron en diferentes días y horarios a fin de conseguir personas de diferentes edades en la muestra.

Estudío en animales
Se obtuvo por donación, animales domésticos que vivían en el intra o peridomicilio (hasta una distancia de 30 m). Además se capturaron ratas y marsupiales con trampas Sherman y Tomahauwk colocados durante doce horas en el intra y peridomicilio durante cuatro noches consecutivos en las comunidades de Alto Koribeni, Polo Santuyoc y Misión Koribeni.

Se obtuvieron muestras de sangre por punción venoso de perros y ovinos. En cuyes, ratas y marsupiales la muestra se obtuvo por punción intracardiaca, estas muestras fueron transportadas en termos a 4-8 ºC hasta el PS. Todos ellos fueron codificadas con un número correlativo correspondiente a la familia de donde pertenecía el animal seguido de la letra C (cuy), P (perro) y 0 (oveja). Se utilizó numeración diferente para ratas y marsupiales debido a que fueron capturados en el campo. En ellos se utilizó las letras M (marsupial) y R (rata).

Todos los muestras fueron centrifugadas y el suero sobrenadante enviado al INS a 4 ºC hasta su procesamiento. Además se obtuvo, de los animales, muestras de orina y cuando esto no era posible, se trituraba al riñón y se inoculaba en el medio de cultivo especial. En las casas visitados no se encontró ganado vacuno, equino ni caprino por lo que no se incluyeron estos animales en la muestra.

Test serológícos
En el INS, las muestras de suero, fueron procesadas, según protocolo, por el test de aglutinación macroscópico para la detección de anticuerpos totales como prueba de screening o tamizaje.

A los sueros positivos, se procedió a realizar el test de aglutinación microscópica para definir el nivel de anticuerpos y los serovares de Leptospira con mayor prevalencia. los serovares utilizados, por el INS, fueron: Andamana (no es patógeno pero produce reacción cruzada con serovares patógenos), Australis, Autumnalis, Ballum, Bataviae, Canícola, Cinoptery, Djasiman, Javanica, Pomona, Pyrogenes, Wolffi, Tarassovi, Icterohaemorrhagiae. Se consideraron positivas las muestras con titulación mayor o igual a 1:100; títulos menores se consideraron negativos para evitar los resultados falsos positivos por reacción cruzada.

Aíslamiento de Cepas
Para el cultivo, las muestras de orina y triturado de riñón fueron inoculadas en medio de cultivo de Fletcher y se mantuvieron a temperatura ambiente hasta su llegada al Instituto Nacional de Salud donde fueron incubadas a 28 ºC.

Las muestras fueron nuevamente cultivados en medios de Fletcher y Korthof realizándose continuamente pasajes seriados. Las muestras originales y los subcultivos fueron observadas por nueve semanas, siendo la última fecha de observación el 25 de octubre de 1998.

RESULTADOS

Se obtuvo 164 muestras de pobladores de las diferentes comunidades, lo que representaba una persona por cada familia visitada. De estos sueros humanos 41 (25%) mostraron serología positiva de anticuerpos contra Leptospira interrogans. El serovar que se obtuvo, con mayor frecuencia fue Autumnalis (31%), el resto se encontró en menor proporción (Tabla 1).

Se obtuvo 33 muestras de sangre canina; en 12 cones (36,4%) el resultado fue positivo. El serovar encontrado con mayor frecuencia fue Autumnalis (27,8%) seguido de Australis y Pomona (Tabla 2). El serovar Canícola no se encontró en ninguna de las 33 muestras de suero canino examinado. Asimismo, se obtuvo 33 muestras para cultivo correspondientes a 18 animales (ratas, cuyes y marsupiales).

De un total de 11 cuyes se colectó sangre, de tres se obtuvo triturado de riñón y de ocho se colectó solamente muestra de orina. Solamente de una oveja se obtuvo muestra de orina.

En el trampeo se capturó seis ratas y dos marsupiales. De los marsupiales se obtuvo sangre, orina y triturado de riñón en uno de ellos y en el otro sólo triturado de riñón,

Todas las muestras para serología y cultivo, de estos animales, fueron negativas.

DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

En el pais, la leptospirosis no es una enfermedad de notificación inmediata y no hay reportes serológicos continuos, La real prevalencia de la enfermedad está mimetizado por el subrregistro existente debido a que muchos casos no son diagnosticados a consecuencia de la oligosintomatología que la caracteriza. Los casos que son sintomáticos pueden ser similares a otras enfermedades prevalentes en el Perú y pueden ser diagnosticados erróneamente como tales.

De esta manera los datos existentes proviene de estudios de seroprevalencio realizados en áreas elegidos por los investigadores según diferentes circunstancias; también, en otras oportunidades provienen de tamizajes realizados en el laboratorio de referencia en los muestras de los pacientes con síndrome febril sin diagnóstico etiológico. Por último, menos frecuentemente, las muestras analizadas pueden provenir de pacientes que presentaban signos y síntornas compatibles con las definiciones de caso.

Los estudios de Liceras y Herrer han mostrado la gran variedad de serovares que existen en el país. En nuestros resultados el género Autumnalis fue prevalente en los sueros obtenidos de humanos y de canes, lo que presupone que puedan ser los reservorios que brindan la infección a los humanos. No fue encontrado el serovar icterohaemorrhogiae, que suele estar asociado a ictericia y otra sintomatología. Quizá este hallazgo se relacione de alguno manera con lo presencia de casos asintomáticos que encontramos. Llamó la atención que el serovar canícola no se haya encontrado en ninguno de los 33 canes estudiados.

En la provincia de Pomabamba, Ancash, Pachas en agosto de 1999, encontró 25% (3/12) de los sueros de canes positivos al serovar canícola. Otros serovares reportados en canes son L. bataviae y L. hyos.

En otro estudio serologico realizado en ratas capturados en el Mercado Central de la ciudad de Lima el 32,9% (195/591) presentaron anticuerpos contra leptospiras y de ellos el 85% (167/195) presentó anticuerpos a L. icterohaemorrihagiae. Sin embargo, sólo el 2,7% (3/112) de los sueros de las personas que trabajaban en dicho mercado fueron positivos a L. canícola.

En nuestro estudio los datos son descriptivos y corresponden a un estudio de corte transversal de prevalencia que se obtienen en el Perú y el mundo cuando se estudia a poblaciones humanas y de animales de diferentes áreas.

Es necesario realizar otros estudios y en diferentes áreas, con un tamaño de muestra mayor especialmente para los animales, para lograr resultados con mayor precisión respecto a la prevalencia de infección por leptospira en ellos. En esta oportunidad la muestra obtenida de animales fue pequeña. Diversos factores contribuyeron a esto, como la dificultad para la obtención de muestra, el corto periodo de estudio y el reducido grupo de investigadores para la colecta de muestras.

En el área de estudio se observó la existencia de algunos factores de riesgo que en otros estudios se han encontrado asociados a la transmisión de la leptospirosis, como el consumo de agua de manantiales y riachuelos, crianza de animales domésticos intradomiciliarios, presencia de roedores en las viviendas, almacenamiento de las cosechas en los dormitorios y el hábito de bañarse en los ríÍos o manantiales. A pesar que la mayoría de los pacientes con infección por leptospiras se presentan sin ictericia (90 a 95%), es importante que el personal de salud considere a esta enfermedad en el diagnóstico diferencial cuando se presenten casos con sindrome icterohemorrágico o febril.

Basándose en estos y otros precedentes el Ministerio de Salud ha iniciado, la vigilancia del síndrome icterohemorrágico en localidades de Cusco, Huánuco y Ayacucho habiéndose considerado a la leptospirosis dentro de los daños a vigilar.

Después del primer año, el estudio piloto de esta vigilancia, ha terminado y actualmente se encuentra en proceso de análisis.

Agradecimientos
Los autores agradecen a las autoridades de la UBAS Sta Ana, a los profesionales de salud del PS de la Misión Koribeni y a la población en general de la misión por su colaboración en el estudio.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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